TERAPIA CON STEM CELLS EN NEUMONIA 

Fuente: https://lunginstitute.com/treatment/stem-cell-treatment-basics/ 

Características clínicas, diagnósticas y pronosticas de pacientes con neumonía por Pneumocystis jiroveci en individuos infectados por virus de inmunodeficiencia humana e individuos inmunocomprometidos por otra etiología

Las células madre mesenquimales mejoran la supervivencia y el aclaramiento de bacterias en murino Escherichia coli neumonía.
El tipo de Stem Cells fueron células madre adultas (mesenquimales) (MSCs)singénicas  de ratones.
Métodos y resultados MSCs singénicas de ratones de tipo salvaje se aislaron y se administraron por vía intratraqueal a los ratones 4 h después de que los ratones fueron infectados con Escherichia coli . 3T3 fibroblastos y tamponada con fosfato salino (PBS) se utilizaron como controles para todos los experimentos in vivo. Supervivencia, lesión pulmonar, los recuentos bacterianos y los índices de inflamación se midieron en cada grupo de tratamiento. El tratamiento con MSCs de tipo salvaje mejoró 48 h supervivencia (MSC, 55%; 3T3, 8%; PBS, 0%; p <0,05 para MSC vs grupos 3T3 y PBS) y la lesión de pulmón en comparación con ratones de control. Además, de tipo salvaje MSCs mejorarse la eliminación de bacterias desde el espacio alveolar tan pronto como 4 h después de la administración, un efecto que no se observó con los otros grupos de tratamiento. El efecto antibacteriano con MSCs se debía, en parte, a su regulación por incremento de la antibacteriano lipocalina proteína 2. [1]

http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0716-10182014000400007&script=sci_arttext
http://thorax.bmj.com/content/67/6/533

TRANSGENICO EN LA NEUMONIA  

La sobreexpresión de sICAM-1 en el espacio del epitelio alveolar resultado una respuesta inflamatoria exagerada y muerte prematura en bacterias Gram negativo neumonía 

Como parte de los extraordinarios avances científicos acaecidos en la segunda mitad del siglo XX, el hombre pudo lograr la manipulación. En este caso se hablara sobre el uso de transgenicos en la neumonía, usando un Ratón transgénico (SPC-sICAM-1), cuyo metodo de obtención se basa en Clonación múltiple, Ultra-Turrax T8 homogeneizador, fecundación in vitro.

Uso: El alveolar sICAM-1 modula la inflamación pulmonar.y la manipulación de ICAM-1 puede modular la respuesta del huésped a infecciones pulmonares  Gram negativas.

Referencia Bibliográfica 
https://respiratory-research.biomedcentral.com/articles/10.1186/1465-9921-12-12
http://www.granma.cu/ciencia/2016-12-16/cultivos-transgenicos-para-la-sostenibilidad-alimentaria-16-12-2016-21-12-20

 

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

Definición ADN recombinante:
Es un tipo de ADN  formado por la unión de dos moléculas  de diferente origen.Se distingue entre el ADN recombinante natural, y el ADN recombinante sintético.

El ADN recombinante en la naturaleza se recombina de manera natural por procesos como la infección viral reproducción sexual y la transformación bacteriana.

Por ejemplo los  virus transfieren su ADN envuelto en una cubierta con proteínas, entre bacterias, especies de eucariotas o  virus, transfieren su material genético durante la infección. Dentro de la célula infectada, los genes se replican y dirigen la síntesis de proteínas virales
Los plásmidos, estructuras de ADN extracromosómicas, que promueven el inicio de la conjugación bacteriana. El proceso de conjugación bateriana se basa en que dos seres de la misma especie se comporten como donador el uno y receptor e otro, para intercambiar material genético.

Bibliografía


http://microral.wikispaces.com/3.+Gen%C3%A9tica+bacteriana. 

ADN RECOMBINANTE
NEUMONÍA

 Familias de la proteina de superficie PspA de Streptococcus pneumoniae. relación con serotipos y localizacion

Se pretende identificar las familias de PspA de aislamientos de pacientes de nuestra región y relacionarlas con los serotipos prevalentes y patologías. entre las características importares tenemos: El gen  PspA, Enzima de restricción, LSM12/ SKH63 y LSM12/SKH52 y la Enzima ligasa sin especificar. El Vector: Spn ATCC R36A, Cuya Célula receptora son los Cultivos de Streptococcus pneumoniae (Spn). El  Método de transformación; Tris buffer es el Método de inserción del gen, identificando por PCR y electroforesis. 

Bibliografía
http://www.scielo.org.ar/pdf/medba/v70n5/v70n5a07.pdf

Neumonía Prueba de Tamizaje

NEUMONÍA PRUEBA DE TAMIZAJE

Existen varias herramientas para el diagnostico, tratamiento o prevención de la Neumonía, aunque las principales seguirán siendo los exámenes físicos/clínicos y una directa observación en una radiografía. 

 Pruebas de Tamizaje.

En atención primaria, alrededor de 5% de las personas que consultan por enfermedades respiratorias tiene NAC. Las demás consultas corresponden a bronquitis aguda 42%, infecciones vía aérea superior 16%, asma bronquial 6% y sinusitis aguda 6%. Desde esa perspectiva, considerando esa prevalencia de neumonía y asociado al examen físico, de todos los pacientes que cumplen con los requisitos clínicos para diagnosticar neumonía, sólo un 50% tiene posibilidades de tener una neumonía lo cual podría hacer necesario una manera de prevenir estas patologías.

En varios estudios se hicieron pruebas preventorias, desde radiológicas como una radiografía pulmonar hasta estudios mediante contrainmunoelectroforesis (CIE), pruebas de látex (LA), enzimo-inmuno-análisis con Dot (ELISA_Dot) y hasta pruebas de hibridación en genes propios de la neumonía. Se hicieron también estudios en cultivos y pruebas biomoleculares para encontrar: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Enterobacterias, Moraxella catarrhalis, Legionella spp, Mycobacterium tuberculosis, Anaerobios de la boca, Virus respiratorio sincitial, Adenovirus, Virus influenzae, Virus Parainfluenzae, Enterovirus, Rinovirus, Pneumocystis carinii. Posibles etiologías de la neumonía.

Pruebas confirmatorias 

• Gasometría arterial
• Hemocultivo y cultivo de esputo
• Conteo sanguíneo completo par verificar el conteo de glóbulos blancos
• Broncoscopía
• Toracocentesis 

Referencias Bibliograficas

http://www.news-medical.net/health/Pneumonia-Diagnosis-%28Spanish%29.aspx 

http://www.intramed.net/contenidover.asp?contenidoID=48796 

http://www.mayoclinic.org/diseases-conditions/pneumonia/diagnosis-treatment/diagnosis/dxc-20204716

MICROARRAY NEUMONÍA

Pacientes intubados que presentan traqueobronquitis o neumonía tienen patrones distintivos de expresión genética del sistema del complemento en el período previo a la infección: un estudio piloto

Los pacientes intubados que presentan traqueobronquitis o neumonía tienen patrones distintivos de expresión genética del sistema del complemento en el período previo a la infección: un estudio piloto. Manteniendo el objetivo de identificar y comparar la expresión de genes VAP / IVA “firmas” utilizando microarrays de ADN de todo el genoma. Con muestras de Secreciones traqueales y sangre.
El Tipo de ácido nucleico a ser extraído fue  RNA.

Se realizó un estudio aplicado prospectivo de los patrones de la expresión genética de los grupos con NAV y TAV, estableciendo comparaciones tanto en la fase previa a la infección como en la fase infecciosa. El tipo de prueba a realizar fue Microrrays de DNA. La extracción de ADN se realizó mediante: 

Lisis: Sistema PAXgene Blood RNA 

Purificación: Sistema PAXgene Blood RNA 

Separación: Sistema PAXgene Blood RNA 

Genes a amplificar: Cyanine 3-CTP-cRNA marcado

Visualización: Análisis IPA 

Desnaturalización: GeneSpring GX 11.0

Hibridación: GeneSpring GX 11.0

Extensión: GeneSpring GX 11.0

Numero de ciclos: GeneSpring GX 11.0

Conclusión

Se realizó un estudio aplicado prospectivo de los patrones de la expresión genética de los grupos con NAV y TAV, estableciendo comparaciones tanto en la fase previa a la infección como en la fase infecciosa.

Referencia Bibliografica

http://www.medintensiva.org/en/intubated-patients-developing-tracheobronchitis-or/articulo/S2173572712000768/

DETECCIÓN POR PCR EN PACIENTES CON NEUMONÍA ADQUIRIDA EN LA COMUNIDAD

                   

Tema: Detección por PCR múltiple de gérmenes atípicos en pacientes con neumonía adquirida de la comunidad 
Objetivo:- Detectar  del agente causal de forma más rápida y sensible, sobre todo en el caso de los patógenos difíciles de cultivar.  
- Permitir  la detección de los microorganismos analizados en las muestras, mostrando las mejores perspectivas en sensibilidad para el diagnóstico microbiológico 
Tipo de muestra biológica: Secreción faríngea, lavado broncoalveolar y esputo
Tipo de ácido nucléico a ser extraído: ADN viral y ARN viral
Gen a amplificar: 16S rRNA, OMP o la proteína 60-kDa rica en cisteína
Extracción de ADN:

• Lisis: Kit comercial Wizard Genomics

• Purificación: Kit comercial Wizard Genomics

• Separación: Kit comercial Wizard 

Número de pares de bases: 352 pares de bases en M. pneumoniae, 333 pares de bases en C. pneumoniae y 233 pares de bases en L. pneumophila.

Tipo de PCR: PCR múltiple 
Visualización: Se realizó diluciones seriadas de las soluciones de los plásmidos control previamente cuantificadas por espectrofotometría ultravioleta. Dichas diluciones fueron sometidas a amplificación empleando los protocolos de PCR estandarizados. En el caso de M. pneumoniae, C. pneumoniae y L. pneumophila el límite de detección fue respectivamente de 0,050 ng/µL, 0,058 ng/µL y 0,001 ng/µL . 

 http://scielo.iics.una.py/scielo.php?pid=S1812-95282012000100004&script=sci_arttext