DETECCIÓN POR PCR EN PACIENTES CON NEUMONÍA ADQUIRIDA EN LA COMUNIDAD

                   

Tema: Detección por PCR múltiple de gérmenes atípicos en pacientes con neumonía adquirida de la comunidad 
Objetivo:- Detectar  del agente causal de forma más rápida y sensible, sobre todo en el caso de los patógenos difíciles de cultivar.  
- Permitir  la detección de los microorganismos analizados en las muestras, mostrando las mejores perspectivas en sensibilidad para el diagnóstico microbiológico 
Tipo de muestra biológica: Secreción faríngea, lavado broncoalveolar y esputo
Tipo de ácido nucléico a ser extraído: ADN viral y ARN viral
Gen a amplificar: 16S rRNA, OMP o la proteína 60-kDa rica en cisteína
Extracción de ADN:

• Lisis: Kit comercial Wizard Genomics

• Purificación: Kit comercial Wizard Genomics

• Separación: Kit comercial Wizard 

Número de pares de bases: 352 pares de bases en M. pneumoniae, 333 pares de bases en C. pneumoniae y 233 pares de bases en L. pneumophila.

Tipo de PCR: PCR múltiple 
Visualización: Se realizó diluciones seriadas de las soluciones de los plásmidos control previamente cuantificadas por espectrofotometría ultravioleta. Dichas diluciones fueron sometidas a amplificación empleando los protocolos de PCR estandarizados. En el caso de M. pneumoniae, C. pneumoniae y L. pneumophila el límite de detección fue respectivamente de 0,050 ng/µL, 0,058 ng/µL y 0,001 ng/µL . 

 http://scielo.iics.una.py/scielo.php?pid=S1812-95282012000100004&script=sci_arttext